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SaxoCell - Sleeping Beauty Transposon-modifizierte CAR/TCR-T-Zellen

​​​​Neuartige Zelltherapien wie die autologe CAR-T-Zelltherapie sind wichtige zugelassene Behandlungen für lebensbedrohliche hämatologische Krebserkrankungen. Um die Behandlungsmöglichkeiten von neuartigen Zelltherapien auf solide Tumore zu erweitern und die Sicherheit solcher Therapien zu erhöhen, werden in diesem Projekt die Entwicklung und automatisierte Herstellung von Sleeping Beauty-Transposon-modifizierten T-Zellen adressiert. Das übergeordnete Ziel des Vorhabens SB-TRACT ist es, innovative T-Zellprodukte zu entwickeln, die durch nicht-virale Gentransfermethoden modifiziert wurden, und diese für die Eignung als klinische Produkte im Bereich des Zukunftsclusters vorzubereiten.

Um den Transport von Transposase-mRNA und Transposon-DNA in T-Zellen zu optimieren und dabei die Viabilität der Zellen zu steigern, werden von der AG Aigner polymere Nanopartikel entwickelt und erprobt, welche beide Vektoren enthalten. Die Aufnahme der Nanopartikel muss dabei möglichst zielgenau erfolgen, um einerseits die Effizienz des Vektortransfers in T-Zellen zu erhöhen und andererseits die Targetierung anderer Zelltypen zu verhindern (sog. targeted delivery). Dies ist besonders für eine spätere in vivo Anwendung des Nanopartikel-basierten Gentransfers entscheidend. Es sollen daher unterschiedliche Nanopartikel getestet werden, die an verschiedene T-Zell-spezifische Antikörper gekoppelt sind. Nach einer Optimierung der allgemeinen Gentransferbedingungen, werden Gentransferraten, Zellviabilität, Vektorkopienzahlen und die Genauigkeit der Zellspezifität verglichen und somit der beste Nanopartikelkandidat für einen Nukleinsäuretransport in T-Zellen bestimmt.

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Projektpartner:






English Project Description

SaxoCell - Sleeping Beauty Transposon-modified CAR/TCR-T cells

Novel cell therapies such as autologous CAR-T cell therapy are important approved treatments for life-threatening hematological cancers. In order to extend the treatment options of novel cell therapies to solid tumors and to increase the safety of such therapies, this project addresses the development and automated production of Sleeping Beauty transposon-modified T cells. The overarching aim of the SB-TRACT project is to develop innovative T-cell products that have been modified using non-viral gene transfer methods and to prepare them for suitability as clinical products in the area of the SaxoCell Cluster4Future.​

For optimal delivery of the transposase-mRNA and the transposon-DNA in T-cells with enhanced viability, the Aigner group develops and analyses polymeric nanoparticles containing both vectors. The nanoparticle uptake should be as targeted as possible, in order to enhance transfection efficacies and avoid delivery into other cell types. This targeted delivery is particularly important with regard to later in vivo applications. Different nanoparticles are developed and tested, with different antibodies coupled. Upon optimization of the general conditions of gene transfer, further studies will assess gene transfer rates, cell viability, vector copy numbers and the precision of cell specificity, for identifying optimal nanoparticle candidates for nucleic acid transport in T-cells.

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